Działanie przeciwzapalne i przeciwgorączkowe c-fikocyjaniny

- Jan 31, 2018 -


Redaktor Sekcji: Yaksh, Tony L .; Hogan, Quinn H.Shih, Chao-Ming MD *; Cheng, Shin-Nan MD, PhD †; Wong, Chih-Shung MD, PhD ‡; Kuo, Yu-Ling MS§; Chou, Tz-Chong PhD§


* Chia-Yi Christian Hospital.

† Wydział Pediatrii, Ogólny Szpital Trójdzielny, Centrum Medyczne Obrony Narodowej.

‡ Katedra Anestezjologii, Ogólny Szpital Trójdzielny, Centrum Medyczne Obrony Narodowej.

§ Wydział Fizjologii, Centrum Medyczne Obrony Narodowej, Tajpej, Tajwan, Republika Chińska.

ABSTRAKCYJNY

TŁO: C-fikocyjanina (C-PC), biliproteina występująca w niebieskozielonych algach, takich jak Spirulina platensis, jest często stosowana jako dietetyczny suplement diety z powodu jego różnych wartości terapeutycznych. Ponadto, w wielu badaniach in vitro i in vivo wykazano aktywność przeciwzapalną C-PC częściowo poprzez hamowanie prozapalnego tworzenia cytokin, indukowalną syntezę tlenku azotu (iNOS) i cyklooksygeanazę-2 (COX-2). Nie zbadano jednak, czy C-PC ma również działanie przeciwnadciśnieniowe w nocycepcji przeciwzapalnej.

METODY: Stosując model indukowanej przez karagenian termicznej przeczulicy bólowej, ocenialiśmy wpływ C-PC na nocycepcję, mierząc opóźnienie wycofania łapy. Aby wyjaśnić związane z tym mechanizmy, określono ekspresję iNOS i COX-2 oraz tworzenie się azotanu i czynnika martwicy nowotworów α (TNF-α) w szczurze szczura.

Wyniki: przed lub po podaniu C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) znacząco osłabił wywołany karageniną nocycepcję zapalną oraz indukcję iNOS i COX-2 w późnej fazie, (4 godz.), Któremu towarzyszyło hamowanie tworzenie aktywności TNF-α, prostaglandyny E2, azotanu i mieloperoksydazy.

WNIOSKI: Na podstawie tych wyników sugeruje się, że hamowanie NO i nadprodukcja prostaglandyny E2 poprzez hamowanie indukcji iNOS i COX-2 oraz atenuacja tworzenia TNF-α i nacieki neutrofili do miejsc zapalnych przez C-PC może przyczynić się do przynajmniej częściowo, do jego działania przeciwhiperalgetycznego.

Jest dobrze przyjętą koncepcją, że każdy ból, czy to ostry, czy przewlekły, obwodowy lub ośrodkowy, pochodzi z zapalenia i odpowiedzi zapalnej. 1 Wywołana przez karageninę odpowiedź zapalna w tylnej łapie szczura, działając jako ostry model zapalenia, była szeroko stosowana do badania nowych leków przeciwzapalnych. 2 Mechanizmy wywoływania nocycepcji wywołanych przez karageninę obejmują złożony łańcuch zdarzeń, w którym uwalniane są różne mediatory, w tym histamina, serotonina, cytokiny prozapalne, tlenek azotu (NO), cyklooksygenaza (COX) i aminy sympatykomimetyczne. 3 Ponadto proponuje się, aby nadwrażliwość na ból wywołana przez karageninę była związana z kaskadowym uwalnianiem cytokin. Pierwszą uwolnioną cytokiną jest czynnik martwicy nowotworów α (TNF-α), który wyzwala uwalnianie interleukiny (IL) -1β, IL-6, syntezę prostaglandyn i sympatycznych amin, co sugeruje, że TNF-α odgrywa wczesną i kluczową rolę dla późniejszych odpowiedzi zapalnych4. Ta koncepcja jest potwierdzona przez fakt, że wstrzyknięcie surowicy neutralizującej endogennego TNF-α znacząco znosi odpowiedź na karagen. 4

Ponadto nadprodukcja zapalnych prostaglandyn, takich jak prostaglandyna E2 (PGE2) i NO, głównie pochodząca z COX-2 i indukowalnej syntazy NO (iNOS), jest również krytycznym mediatorem odpowiedzialnym za patogenezę nocycepcji zapalnej. 5-8 Doniesiono, że inny patogen chorobotwórczy, reaktywne formy tlenu (ROS) odgrywa ważną rolę w utrzymywaniu obrzęku łapy wywołanego przez karageninę. 9


C-fikocyjanina (C-PC), biliproteina występująca w niebieskozielonych algach, takich jak Spirulina platensis, jest stosowana w wielu krajach jako suplement diety z uwagi na różne korzystne działania, w tym działania chroniące wątrobę, zapobiegające schorzeniom, neuroprotekcyjne i zmiatające ROS. obserwowane w różnych modelach eksperymentalnych. 10-12 Ponadto, przeciwzapalne działanie C-PC, w tym osłabienie ekspresji iNOS indukowanej lipopolisacharydem i tworzenie TNF-α poprzez hamowanie aktywacji jądrowego czynnika κB w makrofagach RAW 264.7 i hamowanie aktywności COX-2 i tworzenie leukotrienów B4 zostało zademonstrowane in vitro. 13-15 Na podstawie znaczenia zapalenia w nocycepcji i jego właściwości przeciwzapalnych, proponujemy, że C-PC może również wywierać działanie przeciwnadciśnieniowe przeciw nocycepcji zapalnej poprzez hamowanie tych prozapalnych mediatorów. Chociaż zgłoszono kilka ochronnych skutków C-PC, nie ma informacji o wywołanej karagenem nocycepcji przeciwzapalnej. W niniejszym badaniu, po raz pierwszy wykazaliśmy, że C-PC wykazuje działanie przeciwgorączkowe w wywołanej przez karagenian przeczulicy bólowej i że może występować hamowanie tworzenia TNF-α, NO i PGE2.

METODY

Zwierząt

W badaniu tym wykorzystano męskie szczury Sprague-Dawley (200-250 g) zakupione od National Animal Center (Taipei, Taiwan), które zostały zatwierdzone przez lokalny instytucjonalny komitet do spraw opieki nad zwierzętami i ich wykorzystania. Zwierzęta trzymano w standardowym środowisku i utrzymywano na wodzie z kranu i karmie dla szczurów (Gryzonie Dieta 5010, LabDiet) ad libitum podczas całego badania.

Przewlekła nadwrażliwość termiczna wywołana przez Carrageenana

Ten test przeprowadzono w sposób opisany w poprzednim badaniu. 16 Po pierwsze, szczury miały 30 minut na aklimatyzację do urządzenia przed testowaniem. Ostry stan zapalny był następnie wytwarzany przez podplantarne (i.pl.) podawanie 100 μl 2% (w / v) λ-karagenu (Sigma, St. Louis, MO) rozpuszczonego w normalnym roztworze soli w prawą tylną łapę każdego szczura. Hiperalgezję oceniano, umieszczając tylną łapę powyżej źródła promieniującego ciepła i mierząc opóźnienie wycofania łapy, aby ocenić przeczulicę termiczną co 60 minut przez 240 minut po wstrzyknięciu karageniny za pomocą dostępnego w handlu urządzenia (7370 Plantar Test, UGO Basile, Comerio, Włochy). Dane obliczono jako średnią z trzech powtórzonych pomiarów.

Eksperymentalny projekt

W dodatkowych grupach szczury traktowano albo normalną solanką (0,2 ml, IP), C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP, C-PC o czystości A 620 / A 280 > 3,5, Sigma, St. Louis, MO) lub ibuprofen (50 mg / kg, IP, Sigma, St. Louis, MO) w 30 minut przed lub 75 minut po wstrzyknięciu karageniny. Eksperymentalny schemat projektowy pokazano poniżej. Po wstrzyknięciu karagenu przez 4 h, wysięki łapy i tkanki łapy zebrano w celu zmierzenia poziomów aktywności PGE2, azotanu i TNF-α, COX-2 i iNOS i mieloperoksydazy (MPO). Szczury otrzymujące sól fizjologiczną (IP) w 30 minut przed wstrzyknięciem soli fizjologicznej (i.pl.) działały jako grupa kontrolna, a szczury, którym wstrzyknięto sól fizjologiczną (IP) i karageninę (i.pl.), działały jako grupa karagenowa. W 4 godziny po wstrzyknięciu karageniny zmierzono poziomy TNF-α, PGE2 i azotanu w wysięku łapy i ekspresję COX-2 i iNOS w tkankach łap. Każda grupa zawierała 5-6 szczurów.


pretreatment and posttreatment.jpg


Pomiar cytokin, azotanów i produkcji PGE2 w wysięku z łap

W celu uzyskania wysięku łapy, tylne łapy szczurów pocięto na poziomie kości piętowej i odwirowano przy 400g przez 15 minut w temperaturze 4 ° C w celu zebrania obrzękłego płynu16. Następnie poziomy cytokin i PGE2 w wysięku łapy mierzono przez odpowiednio zestawy do oznaczania enzymatycznego (Genzyme Corporation, Cambridge). Stężenia azotanów w wysiękach łapy mierzono za pomocą analizatora tlenku azotku Sievers'a (Sievers 280 NOA, Sievers, Boulder, CO).

Analiza Western Blot

Miękkie tkanki usunięto z szczurzych łap i homogenizowano w roztworze do lizy zawierającym 10 mM 3 - [(3-cholamidopropylo) dimetyloamonio] -propanosulfonian (CHAPS), 1 mM fluorek fenylometylosulfonylu, 5 ug / ml aprotyniny, 1? M pepstatyny i 10? M leupeptyny w celu uzyskania supernatant przez odwirowanie przy 12000 g przez 20 min. Białka (50 μg) następnie naniesiono na 10% minigel dodecylosiarczanu sodu, minigel standardową. Białka przeniesiono na membrany z difluorku poliwinylidenu i przeprowadzono blotting Western przez dodanie przeciwciał przez noc z przeciwciałami anty-COX-2, anty-iNOS (Transduction Lab, Lexington, KY) lub anty-β-aktyną (Santa Cruz, San Francisco, CA). w 4 ° C, po czym następowała inkubacja z wtórnym przeciwciałem skoniugowanym z peroksydazą chrzanową. Odczynnik ECL (Amersham International Plc., Buckinghamshire, UK) użyto do wykrycia pasm białka, a gęstość względną iNOS i COX-2 określono ilościowo za pomocą densytometrii.

Oznaczenie aktywności MPO

Miękkie tkanki łapy usunięto i przemyto sterylną normalną solą fizjologiczną i homogenizowano w lodowatym 0,5% bromku heksadecylotrimetyloamoniowym w 50 mM buforze fosforanowym (pH = 6,0, 5 ml bromku heksadecylotrimetyloamoniowego / g tkanki) stosując homogenizator (Pro model 200, Monroe). , CT), a następnie poddane działaniu ultradźwięków i odwirowywane przy 15 000 g przez 15 minut w temperaturze 4 ° C. Supernatant zmieszano 1:30 (supernatant: bufor do testu) i odczytano przy 460 nm. Bufor testowy składał się ze 100 mM fosforanu potasu, pH 6,0, 0,083 ml H2O2 (Sigma, 30% roztworu podstawowego rozcieńczonego 1: 1000) i 0,834 ml chlorowodorku o-dianizydyny (Sigma; 10 mg / ml). Aktywność MPO obliczono i wyrażono jako ΔA460 / min / mg białka.

Analiza statystyczna

Dane wyrażono jako średnią ± sem. Różnice między grupami oceniano za pomocą jednostronnej analizy wariancji z analizą post hoc za pomocą testu Scheffe. Wartości P <0,05 uznano="" za="" statystycznie="">

WYNIKI

Wpływ C-PC na hiperalgezję termiczną wywołaną przez karagen

Wstrzyknięcie karagenu do prawej tylnej łapy szczurów wywołało przeczulicę termiczną z istotnym zmniejszeniem opóźnienia wycofania w porównaniu z grupą kontrolną. Wstępne traktowanie za pomocą C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) na 30 minut przed wstrzyknięciem karageniny zahamowało przeczulicę bólową od 1 godziny do 4 godzin w porównaniu z wynikami dla grupy karagenianowej (Fig. 1). Obserwowano także silną aktywność przeciwnadciśnieniową z ibuprofenu (50 mg / kg, IP), niesteroidowego leku przeciwzapalnego (NLPZ). Podobnie, ponowne leczenie C-PC w 75 minut po wstrzyknięciu karageniny również znacznie zmniejszyło przeczulicę bólową (ryc. 1). Opóźnienia wycofania przeciwległej lewej tylnej łapy (bez iniekcji w tej łapie) pozostały stałe na poziomach podstawowych (18,5 ± 1,5 s) podczas całego eksperymentu (dane nie pokazane).



Figure 1. Effect of C-phycocyanin (CPC) on carrageenan-evoked paw thermal hyperalgesia.jpg

Figura 1. Wpływ C-fikocyjaniny (CPC) na przeczulicę termiczną wywoływaną przez karageninę. Sól fizjologiczną (0,2 ml, IP), C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) oribuprofen (50 mg / kg, IP) podawano 30 minut przed lub 75 minut po wstrzyknięciu karagenu (1 mg / łapę, i.pl .). Łapy opóźniające łapę szczurzych tylnych łap oceniono w określonych momentach. Szczury otrzymujące sól fizjologiczną (IP) na 30 minut przed wstrzyknięciem soli fizjologicznej (i.pl.) działały jako grupa kontrolna i sól fizjologiczna (IP) i karagenina (i.pl) - wstrzyknięto ratrakcję w grupach karagenowych (n = 6 w każdej grupie ). * P <0,05, **="" p=""><0,01, ***="" p=""><0,001 względem="" grupy="">


Wpływ C-PC na tworzenie PGE2 i ekspresję COX-2

Leczenie wyższą dawką C-PC (50 mg / kg, IP) w 30 minut przed wstrzyknięciem karagenu powodowało zahamowanie tworzenia się PGE2 i ekspresję białka COX-2 w łapkach wstrzykniętych karagenianem w ciągu 4 godzin w porównaniu z wynikami w grupa karagenowa (ryc. 2).

Wpływ C-PC na powstawanie azotanów i ekspresję iNOS

Traktowanie C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) w 30 minut przed wstrzyknięciem karagenu powodowało zmniejszenie tworzenia azotanów i ekspresję białka iNOS w łapkach wstrzykniętych karagenianem w ciągu 4 godzin w porównaniu z wynikami w grupie karagenianowej (Fig. 3). ).

Figure 2. Effect of C-phycocyanin (CPC) on prostaglandin E2 (PGE2) formation and cyclooxygeanase-2 (COX-2) expression in carrageenaninjected paws.jpg

Figura 2. Wpływ C-fikocyjaniny (CPC) na ekspresję E2 prostaglandyny (PGE2) i ekspresję cyklooksygeanazy-2 (COX-2) w łapach karagenianów. C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) podawano 30 minut przed wstrzyknięciem karagenu, a poziomy PGE2 w wysięku łapy (górne) i ekspresję białka COX-2 w tkankach łap (u dołu) mierzone w 4 godziny po wstrzyknięciu karageniny. Gęstość względną COX-2 określono ilościowo za pomocą densytometrii, a gęstość grupy kontrolnej ustalono jako 1. * P <0,05, **="" p=""><0,01 względem="" grupy="" karagenu="" (n="5" w="" każdej="">


Figure 3. Effect of C-phycocyanin (CPC) on nitrate formation and inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression in carrageenan-injected paws.jpg

Figura 3. Wpływ C-fikocyjaniny (CPC) na tworzenie azotanów i indukowalną ekspresję syntazy tlenku azotu (iNOS) w łapach wstrzykiwanych karagenianem. C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) podawano 30 minut przed wstrzyknięciem karagenu, a poziomy azotanu w wysięku łapy (górnej) i ekspresji białka iNOS w tkance łap (na dole) mierzono w 4 godziny po wstrzyknięciu karageniny. Gęstość względną iNOS określono ilościowo za pomocą densytometrii, a gęstość grupy kontrolnej ustalono jako 1. * P <0,05, **="" p=""><0,01 względem="" grupy="" karagenu="" (n="5" w="" każdej="">

Wpływ C-PC na tworzenie TNF i IL-10

Wstępne traktowanie za pomocą C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) znacząco hamowało wywołany przez karagenan wzrost powstawania TNF w wysiękach łapy w ciągu 4 godzin w porównaniu z wynikami dla grupy karagenianowej (fig. 4). Jednak C-PC nie ma znaczącego wpływu na tworzenie IL-10 (dane nie pokazane).

Wpływ C-PC na aktywność MPO

Zwiększenie aktywności MPO wywołanej przez karageninę w łapach również było znacząco zmniejszone przez leczenie za pomocą C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) (ryc. 5).



Figure4. EffectofC-phycocyanin(C-PC) on tumor necrosis factor (TNF-α) formation in carrageenan-injected paws.jpg

Figura 4. Wpływ C-fikocyjaniny (C-PC) na tworzenie się czynnika martwicy nowotworów (TNF-α) w łapach wstrzykniętych karagenianem. C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) podawano 30 minut przed wstrzyknięciem karageniny, a poziomy TNF-α w wysiękach łapy mierzono w 4 godziny po wstrzyknięciu karageniny. *** P <0,001 względem="" grupy="" karagenianowej="" (n="6" cali="" w="" każdej="">

Figure 5. Effect of C-phycocyanin (CPC) on myeloperoxidase (MPO) activity in carrageenan-injected paws.jpg

Figura 5. Wpływ C-fikocyjaniny (CPC) na aktywność mieloperoksydazy (MPO) w łapach wstrzykiwanych karagenem. C-PC (30 lub 50 mg / kg, IP) podawano 30 minut przed wstrzyknięciem karagenu. Następnie usunięto tkankę łapy w celu oznaczenia aktywności MPO w 4 godziny po wstrzyknięciu karageniny. ** P <0,01 względem="" grupy="" karagenu="" (n="6" w="" każdej="">

DYSKUSJA

Chociaż poprzednie badanie wykazało, że C-PC zmniejsza obrzęk łapy wywołany przez karageninę, 17 nie odnotowano wpływu C-PC na zapalenie nocne. Tak więc, niniejsze badanie jest pierwszym, które ocenia, czy C-PC może również wywierać działanie przeciwhiperalgetyczne i dalej badać możliwe mechanizmy przeciwzapalne zaangażowane w szczurzy model wywołanej przez karagenan przeczulicy termicznej. W tym modelu rozwój obrzęku i nocycepcji w tylnej łapie szczura opisano jako zdarzenie dwufazowe.18 Początkową fazę obserwowaną podczas pierwszej godziny przypisano uwalnianiu histaminy i serotoniny; druga faza (4 godziny po wstrzyknięciu karageniny) była spowodowana uwolnieniem mediatorów prozapalnych, w tym substancji podobnych do prostaglandyn. 3 W tym badaniu, po raz pierwszy wykazaliśmy, że przed lub po podaniu C-PC znacznie osłabia wywołaną przez karagenan przegrzanie termiczne, co sugeruje, że C-PC może mieć profilaktyczne i terapeutyczne działanie na nocycepcję zapalną. Ponadto stwierdziliśmy również, że C-PC wykazuje znaczną aktywność przeciwhiperalgetyczną zarówno w fazie wczesnej, jak i późnej. Ponieważ histamina odgrywa ważną rolę w rozwoju indukowanej przez karageninę przepuszczalności naczyń i obrzęku we wczesnej fazie, wynik sugeruje, że C-PC może mieć natychmiastowy wpływ hamujący na uwalnianie histaminy. Hipoteza ta była wspierana przez hamowanie przez C-PC związku 48/80 (uwalnianie histaminy) wywołanego histaminą z komórek mastocytów otrzewnej szczura. 19 W związku z tym C-PC może również wpływać na funkcję komórek tucznych, które są ważnym źródłem do syntezy i uwalniania prostaglandyny D2, leukotrienów, ROS i cytokin, takich jak TNF-α. 20 W tym modelu TNF-α odgrywa wczesną i kluczową rolę w późniejszej odpowiedzi zapalnej poprzez stymulację wytwarzania produktów COX i IL-8, które indukują miejscową produkcję sympatrycznych amin. Tak więc hamowanie tworzenia TNF-α przez C-PC w łapach wstrzykniętych karagenanowi może przyczyniać się do jego działania przeciwhiperalgetycznego. Jednakże C-PC nie miało wpływu na wytwarzanie IL-10 (antagonisty cytokiny), co sugeruje, że jego aktywność przeciwzapalna może nie być mediowana przez wytwarzanie IL-10.

Doniesiono, że podczas rozwoju wywołanego przez karageninę zapalnego nocycepcji obwodowy konstytutywny COX-1 i konstytutywny NOS odgrywają główną rolę we wczesnej fazie (1 h); w późnej fazie (4 godziny), w której COX-2 i iNOS są w pełni aktywowane. Nadprodukcja prostaglandyn i NO głównie syntetyzowanych przez COX-2 i iNOS jest kluczowym mediatorem w utrzymaniu stanu zapalnego. 82,2,23 Ponadto, nadprodukcja NO może reagować z anionem ponadtlenkowym, tworząc bardziej cytotoksyczny nadtlenoazotyn, co często obserwuje się w łapach wstrzykniętych karagenem. Wykazano, że blokowanie indukcji COX-2 i powstawanie PGE2 lub powstawanie NO w oparciu o iNOS wywiera działanie ochronne przeciwko nocycepcji zapalnej i sepsie. 6,16,25 W tym badaniu C-PC znacząco hamował wywołany przez karagenan wzrost wytwarzania PGE2 i azotanów, któremu towarzyszyło tłumienie ekspresji COX-2 i iNOS w łapach szczurów w późnej fazie, co sugeruje, że C-PC może być selektywnym inhibitorem dla COX-2 i iNOS. Stąd możliwe było, że osłabienie nadmiernej produkcji NO i PGE2 przez C-PC, poprzez hamowanie indukcji iNOS i COX-2, może być związane z jego korzystnym działaniem przeciw nocycepcji zapalnej.

Zapalenie często powoduje aktywację neutrofili i infiltrację do uszkodzonych tkanek. Infiltrowane neutrofile mogą również być ważnym źródłem różnych prozapalnych mediatorów, w tym cytokin i wolnych rodników pochodzących od tlenu. 26 Zwiększona aktywność MPO, wskaźnik infiltracji neutrofilów obserwowany w łapach z wstrzykniętym karagenem, był znacząco zmniejszony przez C-PC, co sugeruje, że zahamowanie naciekania neutrofilów może być kolejnym możliwym mechanizmem odpowiadającym za jego aktywność przeciwzapalną. Ponadto badania przeprowadzone na różnych modelach zapalenia wykazały, że C-PC wywierał działanie przeciwzapalne, nie tylko w ostrych modelach zapalenia, ale także w modelu subchronicznym, takim jak ziarnin granulatu bawełnianego u szczurów. 17

Rodzina kinaz białkowych czynnych mitogenowo (MAPK) obejmuje zewnątrzkomórkowe kinazy regulowane sygnałem (ERK), p38 i kinazy N-końcowe C-Jun. P38 aktywowany w neuronach nocyceptorowych zwoju korzeni grzbietowych przez zapalenie obwodowe jest związany z utrzymaniem zapalnej przeczulicy bólowej. 27 Wykazano, że zapalenie wywołane przez karageninę powoduje również fosforylację rdzeniowego p38 MAPK. Ponadto, p38 MAPK reguluje syntezę cytokin, w tym TNF-α i IL-1β, jak również indukcję COX-2 i iNOS, oraz blokującą fosforylację p38 MAPK, co powoduje wyraźne zahamowanie w obrzęku zapalnym i przeczulicy bólowej. 29,30 Wyniki te wskazują, że hamowanie p38 MAPK może mieć działanie przeciwhiperalgetyczne. Niedawne badania wykazały, że C-PC tłumi drgawki wywołane niedokrwieniem i reperfuzją poprzez działanie antyapoptotyczne poprzez hamowanie aktywacji p38 MAPK i nasilanie aktywacji ERK1 / 2. Zatem możliwe jest, że działanie przeciwhiperalgetyczne C-PC może być również związane z modulacją p38 MAPK i ERK1 / 2.

Standardowy lek przeciwzapalny, ibuprofen, stosowany w doświadczeniu jako kontrola pozytywna, wykazywał również silną aktywność przeciwnadciśnieniową. Chociaż NLPZ, w tym ibuprofen i indometacyna, są najczęściej stosowanymi lekami do leczenia stanów zapalnych, często wywołują szereg poważnych działań niepożądanych, w tym toksyczność żołądkowo-jelitową (GI), taką jak krwawienie z przewodu pokarmowego, wynikające z zaburzeń czynności płytek. Ponadto, tworzenie niektórych prozapalnych cytokin, takich jak TNF-α, jest także modulowane przez endogenne prostaglandyny in vivo 33, a leczenie ibuprofenem może prowadzić do wyraźnego podniesienia poziomów TNF-α i IL-6 w surowicy, czemu towarzyszy wyższa śmiertelność. w mysim wstrząsie endotoksycznym. Sugeruje się zatem, że niekorzystny wpływ na GI i nasilone reakcje zapalne powodowane przez NLPZ mogą być częściowo spowodowane ich nieselektywnym hamowaniem COX. 35 Nasze poprzednie i obecne wyniki wskazują, że C-PC jest selektywnym inhibitorem COX-2 i iNOS, który pomaga zapobiegać lub zmniejszać niepożądane działania NLPZ. Donoszono, że LD50 indometacyny wynosi 12 mg / kg PO u szczurów. Jednakże nie ma zwiększonej śmiertelności u szczurów i zmian w zachowaniu lub narządach, nawet przy wysokiej dawce C-PC (3 g / kg, PO) 17, co sugeruje, że C-PC jest znacznie bezpieczniejszy niż tradycyjne NLPZ. W oparciu o te cechy, C-PC może być lepszym wyborem niż NLPZ do leczenia nocycepcji zapalnych.

W tym badaniu najpierw wykazaliśmy, że C-PC łagodzi nadwrażliwość termiczną wywołaną przez karageninę. Ponadto proponujemy, że mechanizmy przeciwhiperalgetyczne C-PC mogą być związane z hamowaniem nadprodukcji NO i PGE2 poprzez hamowanie indukcji iNOS i COX-2. Ponadto może być również zaangażowane hamowanie tworzenia TNF-α i naciekania neutrofili w miejscach zapalnych. Te odkrycia sugerują, że C-PC może być potencjalnym terapeutycznym lekiem do zmniejszania nocycepcji przeciwzapalnych.

REFERENCJE

1. Omoigui S. Biochemiczne źródło bólu: źródłem wszelkiego bólu jest stan zapalny i odpowiedź zapalna. Część 2 profilu 3-zapalnego zespołów bólowych. Med Hypotheses 2007; 69: 1169-78

2. Nakamura M, Ferreira SH. Obwodowy składnik współczulny w hiperalgezji zapalnej. Eur J Pharmacol 1987; 135: 145-53

3. Kumar R, Clermont G, Vodovtz T, Chow CC. Dynamika ostrego zapalenia. J Theor Biol 2004; 230: 145-55

4. Cunha FQ, Poole S, Lorenzetti BB, Ferreira SH. Kluczowa rola czynnika martwicy nowotworów alfa w rozwoju hiperalgezji zapalnej. Br J Pharmacol 1992; 107: 660-4

5. Vane JR, Mitchell JA, Appleton I, Tomlinson A, Bishop-bailey D, Croxtall J, Willoughby DA. Indukowalne izoformy cyklooksygenazy i syntazy tlenku azotu w zapaleniu. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91: 2046-50

6. Portanova JP, Zhang Y, Anderson G. D, Hauser SD, Masferrer JL, Seibert K., Gregory SA, Isakson PC. Selektywna neutralizacja prostaglandyny E2 blokuje proces zapalny, hiperalgezję i wytwarzanie interleukiny 6 in vivo. J Exp Med 1996; 184: 883-91

7. Moncada S, Palmer RMJ, Higgs EA. Tlenek azotu: fizjologia, patofizjologia i farmakologia. Pharmacol Rev 1991; 43: 109-42

8. Salvemini D, Wang ZQ, Wyatt PS, Bourdon DM, Marrino MH, Manning PT, Currie MG. Tlenek azotu: kluczowy mediator we wczesnej i późnej fazie zapalenia łapy szczura wywołanego przez karageninę. Br J Pharmacol 1996; 118: 829-38

9. Boughton Smith NK, Deakin AM, Follenfant RL, Whittle BJ, Garland LG. Rola rodników tlenowych i metabolitów kwasu arachidonowego w odwrotnej reakcji pasywnej Arthusa i obrzęku łapy karagenu u szczurów. Br J Pharmacol 1993; 110: 896-902

10. Romay C, Gonzalez R, Ledon N, Remirez D, Rimbau V. C-fikocyjanina: biliproteina o działaniu przeciwutleniającym, przeciwzapalnym i neuroprotekcyjnym. Curr Prot Pept Sci 2003; 4: 207-16

11. Vadiraja BB, Gaijwad NW, Madyastha KM. Hepaochronny efekt C-fikocyjaniny: ochrona tetrachlorku węgla i R (+) - hepatotoksyczność zależna od pulegonu u szczurów. Biochem Biophys Res Commun 1998; 249: 428-31

12. Chiu HF, Yang SP, Kuo YL, Lai YS, Chou TC. Mechanizmy zaangażowane w działanie przeciwpłytkowe c-fikocyjaniny. Br J Nutr 2006; 95: 434-9

13. Reddy CM, Bhat VB, Kiranmai G, Reddy MN, Reddanna P, Madyastha KM. Selektywne hamowanie cyklooksygenazy-2 przez C-fikocyjanina, biliproteinę z Spirulina platensis. Biochem Biophys Res Commun 2000; 277: 599-603

14. Romay C, Ledon N, Gonzalez R. Ekstrakt fikocyjanowy wykazuje poziom leukoltrienu B4 w teście zapalenia ucha myszy wywołanego kwasem arachidonowym. J Pharm Pharmacol 1999; 51: 641-2

15. Cherng SC, Cheng SN, Tarn A, Chou TC. Działanie przeciwzapalne c-fikocyjaniny w makrofagach RAW 264.7 stymulowanych lipopolisacharydami. Life Sci 2007; 81: 1431-5

16. Chou TC, Chang LP, Li CY, Wong CS, Yang SP. Przeciwzapalne i przeciwbólowe działanie baicyny. Anesth Analg 2003; 97: 1724-9

17. Romay C, Ledon N, Gonzalez R. Dalsze badania nad przeciwzapalną aktywnością fikocyjaniny w niektórych zwierzęcych modelach stanu zapalnego. Inflamm Res 1998; 47: 334-8

18. Ocet R, Schreiber W, Hugo R. Dwufazowy rozwój obrzęku karageniny u szczurów. J Pharmacol Exp 1969; 166: 96-103

19. Remirez D, Ledon N, Gonzalez R. Rola histaminy w hamującym działaniu fikocyjaniny w eksperymentalnych modelach alergicznej odpowiedzi zapalnej. Mediators Inflamm 2002; 11: 81-5

20. Williams CM, Galli SJ. Zróżnicowane potencjalne role efektorowe i immunoregulacyjne komórek tucznych w chorobie alergicznej. J Allergy Clin Immunol 2000; 105: 847-59

21. Ferreira SH, Lorenzetti BB, Pollle S. Bradykinin inicjuje hiperalgezję zapalną z udziałem cytokin. Br J Pharmacol 1993; 110: 1227-31

22. Dirig DM, Isakson PC, Yaksh TL. Wpływ inhibicji COX-1 i COX-2 na indukcję i utrzymanie wywołanej przez karagenan przeczulicy termicznej u szczurów. J Pharmacol Exp Ther 1998; 285: 1031-8

23. Meller ST, Cummings CP, Traub RJ, Gebhart GF. Rola tlenku azotu w rozwoju i utrzymywaniu się nadwrażliwości spowodowanej przez iniekcyjne wstrzyknięcie karagenu u szczurów. Neuroscience 1994; 60: 367-74

24. Salvemini D, Wang ZQ, Bourdon DM, Stern MK, Currie MG, Manning PT. Dowód na udział peroksynitrytu w wywołanym przez karagenan obrzęku łapy szczura. Eur J Pharmacol 1996; 303: 217-20

25. Zhang Y, Shafferm A, Portanova J, Seibert K., Isakson PC. Hamowanie cyklooksyoksyazy-2 szybko odwraca stan zapalny hiperalgezji i wytwarzanie prostaglandyny E2. J Pharmacol Exp Ther 1997; 283: 1069-75

26. Fantone JC, Ward PA. Rola wolnych rodników i metabolitów pochodnych tlenu w reakcjach zapalnych zależnych od leukocytów. Am J Pathol 1982; 107: 397-418

27. Ji RR, Samad TA, Jin SX, Schmoll R, Woolf CJ. Aktywacja p38 MAPK przez NGF w pierwotnych neuronach czuciowych po zapaleniu zwiększa poziomy TRPV1 i utrzymuje przeczulicę cieplną ciepła. Neuron 2002; 36: 57-68

28. Schafers M, Svensson CI, Sommer C, Sorkin LS. Czynnik martwicy nowotworów-alfa indukuje mechaniczną allodynię po podwiązaniu nerwu rdzeniowego przez aktywację p38 MAPK w pierwotnych neuronach czuciowych. J Neursci 2003; 23: 2517-21

29. Badger AM, Bradbeer JN, Votta B, Lee JC, Adams JL, Griswold DE. Profil farmakologiczny SB 203580, selektywnego inhibitora kinazy wiążącej cytokiny białko / kinazę p38, w zwierzęcych modelach zapalenia stawów, resorpcji kości, szoku endotoksynowym i funkcji odpornościowej. J Pharmacol Exp Ther 1996; 279: 1453-61

30. Nishikori T, Irie K, Suganuma T, Ozaki M, Yoshioka T. Działanie przeciwzapalne FR167653, inhibitora kinazy białkowej aktywowanego mitogenem p38, w mysich modelach ostrego zapalenia. Eur J Pharmacol 2002; 451: 327-33

31. Khan M, Varadharaj S, Ganesan LP, Shobha JC, Naidu MU, Parinandi NL, Tridandapani S, Kutala VK, Kuppusamy P. C-fikocyjanina chroni przed uszkodzeniem niedokrwienno-reperfuzyjnym serca poprzez zaangażowanie sygnalizacji p38 MAPK i ERK. Am J Physiol Heart Circ Physiol 2006; 290: H2136-H2145

32. McCathy DM. Porównawcza toksyczność niesteroidowych leków przeciwzapalnych. Am J Med 1999; 107: 37S-47S

33. Sirota L, Shacham D, Punsky I, Bessler H. Ibuprofen wpływa na produkcję cytokin pro i przeciwzapalnych przez komórki jednojądrzaste noworodków urodzonych przedwcześnie. Biol Neonate 2001; 79: 103-8

34. Pettipher ER, Wimberly DJ. Inhibitory cyklooksygenazy zwiększają produkcję i śmiertelność czynnika martwicy nowotworu w mysim wstrząsie endotoksycznym. Cytokine 1994; 6: 500-3

35. Wallace JL, Carter L, McKnight W, Tries S, Laufer S. ML 3000 zmniejsza syntezę prostaglandyn w żołądku bez powodowania uszkodzenia śluzówki. Eur J Pharmacol 1994; 271: 525-31

36. Monografia. Indometacyna. W: Barnhart ER ed. 43 ed. Poradnik lekarza. New Jersey: Medical Economics Co., 1989; 1345-350


Znajomość branży

Produkty powiązane

  • Natural Food Colorant Spirulina Extract Powder Natural Blue Pigment
  • Słodycze Dodatek Natural Blue Sweets Colorant Natural Colorant
  • Wysokiej jakości super spirulina w proszku
  • Ekstrakt z płynnej niebieskiej żywicy Wyciąg spiruliny Fikocyjanina
  • Wyciąg z roślin Wyciąg z korzenia Spirulina Phycocyanin Natural Blue Pigment
  • Woda rozpuszczalny w czystej Spirulina fluorescencji fikocyjaninę proszek